程序降温仪分类和使用步骤介绍

 　　程序控制冷冻装置俗称：程序降温仪，也称为程序冷冻仪、胚胎冷冻仪、细胞冷冻仪、程控降温仪；广泛用于冻存细胞、胚胎等。采用微机控制技术，软件，能较准确地控制液氮的施放量，从而保证被冻存的生物制品以适宜的冷冻速率降温冷冻。该仪器具有操作简便、人机界面清楚。

　　程序降温仪是实现生物材料深低温保存的关键设备，根据降温及控制原理不同，可以将其分为两类：①液氮喷射式降温仪。②升降式降温仪。它们均以液氮为制冷源。程序降温仪主要由冷却室、低温电磁阀、风扇、温度传感器、放大电路、微处理机和液氮容器组成。

　　液氮喷射式降温仪适合较大容积样本的降温保存，优点在于控温好，受外界环境干扰小，但是其价格昂贵，液氮消耗量大，液氮中如有少量水分就会造成输送管道堵塞和低温电磁阀失灵。

　　升降式降温仪由液氮容器、步进机、微机控制系统和记录仪组成。它是利用液氮的自然蒸发在杜瓦瓶颈部所形成的温场（0~-196℃），由步进机根据预先设定的降温、复温程序控制生物标本在此温度区内上下移动的速率，来控制标本的温度和降温速率。

　　程序降温仪步骤：

　　(1)冷冻前24-48小时更换半量或全量培养基，使细胞处于指数生长期。

　　(2)配制冷冻保存溶液(使用前配制)：另取一离心管，加入培养基、血清，逐滴加入二甲基亚砜(DMSO)至20%浓度，即制成双倍的冻存液，置于室温下待用。

　　(3)离心收集培养之细胞，用加血清的培养基重悬起细胞，取少量细胞悬浮液(约0.1ml)计数细胞浓度及冻前存活率。

　　(4)取与细胞悬液等量的冻存液，缓慢逐滴加入细胞悬液，并晃动试管，制成细胞冻存悬液(DMSO后浓度为5～10%)，使细胞浓度为1～5×106cells/ml，混合均匀，分装于已标示*之冷冻保存管中，1～2ml/vial，并取少量细胞悬浮液作污染检测。严密封口后，注明细胞名称、代数、日期。然后进行冻存。