2101程序降温仪的细胞冻存操作步骤 2101程序降温仪简单来说由程序来控制温度，慢慢的逐步减低保存温度，以免减温速度过快，冰晶刺破冻存样品（如细胞、胚胎，降温过快冰晶容易刺破其细胞壁），从而使得样品失效。也称为程控降温仪、胚胎冷冻仪等等。主要应用在精子、细胞、胚胎等领域的储存，以及骨髓、造血干细胞、皮肤、角膜、内分泌腺体、以及血管和瓣膜等的冷冻保存。
2101程序降温仪进行细胞冷冻保存：
1.材料
生长良好之培养细胞、新鲜培养基、DMSO、无菌塑料冷冻保存管、0.4%(w/v)trypanblue、血球计数盘与盖玻片、2101程序降温仪。
2.冷冻保存方法
(1)传统方法：冷存管置于4℃10分钟>-20℃30分钟>-80℃16-18小时(或隔夜)>液氮槽长期储存。-20℃不可超过1小时，以防止胞内冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
(2)程序降温：利用已设定程序的2101程序降温仪以-1~-3℃/分钟之速度由室温降至(-80℃以下)-120℃，再放在液氮槽长期储存。适用于悬浮型细胞与hybridoma之保存。
3.步骤
(1)冷冻前24-48小时更换半量或全量培养基，使细胞处于指数生长期。
(2)配制冷冻保存溶液(使用前配制)：另取一离心管，加入培养基、血清，逐滴加入二甲基亚砜(DMSO)至20%浓度，即制成双倍的冻存液，置于室温下待用。
(3)离心收集培养之细胞，用加血清的培养基重悬起细胞，取少量细胞悬浮液(约0.1ml)计数细胞浓度及冻前存活率。
(4)取与细胞悬液等量的冻存液，缓慢逐滴加入细胞悬液，并晃动试管，制成细胞冻存悬液(DMSO后浓度为5-10%)，使细胞浓度为1-5×106cells/ml，混合均匀，分装于已标示*之冷冻保存管中，1-2ml/vial，并取少量细胞悬浮液作污染检测。严密封口后，注明细胞名称、代数、日期。然后进行冻存。
2101程序降温仪广泛用于冻存细胞、胚胎等。采用微机控制技术，软件，能较准确地控制液氮的施放量，从而保证被冻存的生物制品以适宜的冷冻速率降温冷冻。操作简便、人机界面清楚。
